Laboratório de Diferenciação Muscular e Citoesqueleto
Sala F2-019; bloco F - 2° andar
Centro de Ciências da Saúde
Cidade Universitária - Ilha do Fundão
Rio de Janeiro, RJ - CEP 21949-900
Telefone: (21) 2562-6429
Cadastro no CNPq
Página atualizada em: 09/04/2013
Comentários de artigos
Cláudia dos Santos Mermelstein
Manoel Luis Costa:
Comentário feito em 9/4/2013
Artigo:
1: Contreras-Vallejos E, Utreras E, Gonzalez-Billault C. Going out of the brain: non-nervous system physiological and pathological functions of Cdk5. Cell Signal.
2012 Jan;24(1):44-52. doi: 10.1016/j.cellsig.2011.08.022. Epub 2011 Sep 8. Review. Erratum in: Cell Signal. 2012 Sep;24(9):1733. PubMed PMID: 21924349.
Esta é uma revisão sobre a Cdk5, que é da família das quinases dependentes de ciclina, que controlam o ciclo celular.
Inicialmente, de forma surpreendente, se achou que essa quinase dependia das proteínas p35 e p39, mas não de ciclinas.
Recentemente se viu que ela pode ser controlada por algumas ciclinas, em particular pela ciclina I, que não controla a progressão do ciclo,
mas ao contrário, é expressa em células diferenciadas não proliferativas. A Cdk5 foi bastante estudada em neurônios, aonde está
relacionada com vários processos como sobrevivencia, migração, plasticidade sináptica e até memória 
( figura 3 do artigo Shukla V, Skuntz S, Pant HC. Deregulated Cdk5 activity is involved in inducing
Alzheimer's disease. Arch Med Res. 2012 Nov;43(8):655-62.. Em outros tipos celulares, a Cdk5 pode estar envolvida em cancer, senescencia, aneuploidia, distrofia muscular, inflamação e diabetes!
. Seu papel na miogênese é a fosforilação dos
filamentos intermediários de Nestina, que acontece durante a diferenciação ou na regeneração. Achei o artigo interessante por que fala de
uma Cdk que não dependente de ciclina, e que controla não o processo em sí da divisão mas a saída do ciclo e vários processos relacionados.
Carolina Pontes Soares
Comentário feito em 15/5/2013
Artigo: FEBS Lett. 2008 Oct 29;582(25-26):3595-600. doi: 10.1016/j.febslet.2008.09.029. Epub 2008 Sep 24.
Taxol and 10-deacetylbaccatinIII induce distinct changes in the dynamics of caveolae.
Ahmed N, Dasari S, Srivastava SS, Sneh A, Ahmad A, Islam Khan M, Krishnasastry MV.
National Centre for Cell Science, Ganeshkhind Road, University of Pune Campus, Pune 411 007, India
O taxol vem demonstrando ser uma droga antitumoral eficaz para o tratamento de vários tipos de câncer em humano. Existe atualmente um grande
desenvolvimento de métodos químico para a síntese do taxol e de seus derivados, e tornou-se claro que seu papel é crucial na atividade citotóxica.
O objetivo deste trabalho foi o de compreender o papel do taxol no que diz respeito à sua funcionalidade. Para isso eles utilizaram cultura de células
HeLa e observaram que o tratamento com o taxol resultou num recrutamento de Caveolina-1 na superfície celular, seguida por internalização. Curiosamente,
após 20 min de tratamento com 10 deacetylbaccatinIII (10-DAB), a cavéola exibiu mais rápido a sua dinâmica enquanto BaccatinIII (BacIII) não induziu qualquer
alteração. Foi observada que a fosforilação de Caveolina-1 é mantida sendo observada após tratamento com o Taxol e a 10-DAB. Com isso este trabalho conclui
que é possível que o taxol possa atuar em vários alvos e a sua cadeia lateral pode ser crucial para este resultado.
Laise Monteiro Campos
Eduardo Andres Rios Morris
Viviande Abrunhosa
Ana Cláudia Batista Possidonio
Comentário feito em 15/5/201:
Endocytosis of flotillin-1 and flotillin-2 is regulated by Fyn kinase.
Este artigo de 2009 mostra que a endocitose das proteínas flotilinas 1 e 2 é mediada pela kinase Fyn, da família Src. A indução da expressão desta kinase
provoca a internalização das flotilinas, porém quando ocorre a inibição de sítios específicos de fosforilação das flotilinas a internalização não acontece
e a marcação de flotilina é membranar.
Marcio Buffolo
Taissa Neustadt
Comentário feito em 8/5/2013
Artigo: Differential Expression of the Na/K-ATPase alfa-1 and alfa-2 genes in a Murine
Myogenic Cell Line.
O artigo investiga como estão expressas as isoformas da enzima em células musculares da linhagem C2C12.
Primeiramente, o artigo comprova que as células C2C12 expressam alfa-1 tanto quando estão mononucleadas (mioblastos)
quanto quando estão multinucleadas e diferenciadas (miotubos). Porém existe uma variação da expressão do RNAm de alfa-2,
sendo esta expressa somente em miotubos, e quanto mais diferenciado (mais tempo no meio de diferenciação), maior é a quantidade
de RNAm. Após este experimento a afinidade das isoformas é testada com a utilização da ouabaína, e analisada por espectrofotometria.
Concluiu-se que a isoforma com maior afinidade à ouabaína estava presente principalmente nos miotubos e a isoforma com menos afinidade,
nos mioblastos. Por último foi feito um ensaio de ligação da isoforma alfa-2, tanto dos mioblastos quanto dos miotubos, com a ouabaína
e comprovou-se que a isoforma alfa-2, que está presente em maior quantidade nos miotubos, era a isoforma com maior afinidade à ouabaína.
Comentário feito em 15/5/201
Resumo do artigo: Na/K pump expression in the L8 rat myogenic cell line: Effects of
Heterologous a Subunit Transfection
Este artigo visa esclarecer como se dá a expressão da Na/K-ATPase na linhagem L8 de rato (músculo esquelético). Primeiramente eles testam a ligação da
Na/K-ATPase existente com a ouabaína (inibidor do subtipo alfa da enzima), e percebem que na concentração de 150nM esta ligação chega a um platô, e isso
significa a concentração de proteína, pois a ouabaína liga-se no sítio do K de 1:1. Para complementar injetam Rb para medir a atividade da enzima, já que
este segue pelo sítio do K (a enzima o coloca para dentro como se fosse o potássio), percebendo que comparado as controle, diminui para 20% a atividade enzimática.
Logo depois foi feito um ensaio de imunofluorescência onde os mioblastos e os miotubos da linhagem L8 foram positivos para alfa-1 e beta-1 e não marcaram
para outros subtipos. O western blotting mostrou o mesmo resultado. Foi feito então um Northern Blotting para confirmar e foi visto o mesmo (alfa-1 e beta-1 positivas).
Testaram então como estaria a expressão da NA/K-ATPase se colocassem um subtipo exógeno desta, retirado de embrião de galinha (já que este tipo de célula possui
muito mais proteínas do que L8). No western blotting foi encontrado marcações do subtipo alfa específico para galinha nas células infectadas, mostrando que
teria dado certo a transfecção com cDNA. Não houve variação na quantidade de expressão de alfa-1 nas células L8 e nas transfectadas (tL8). Por último o
índice de fusão e a atividade da enzima foram medidos e constatou-se que as células tranfectadas formavam miotubos mais rapidamente e as enzimas estavam
mais ativas do que as células controle L8.
Este artigo mostra que a linhagem L8 possui então os subtipos alfa-1 e beta-1 da Na/K-ATPase e que o subtipo alfa-1 é o principal na função de dos mioblastos
e atividade enzimática.